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石蜡油研磨液配制(石蜡油研磨液配制方法)

发布时间:2022-11-07 浏览量:30

本文目录一览:

研磨液成分是什么?

油剂研磨液由航空汽油、煤油、变压器油及各种植物油、动物油及烃类,配以若干添加剂组成。具体的一些成分及含量的话,找英格尔分析这样的检测机构做成分分析的技术来解决。

生物关于DNA的实验

1.实验材料必须准备充足。本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。如果不具备购买活鸡的条件,也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。

2.盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程中DNA的损失。

3.获取较纯净的DNA的关键步骤。

(1)充分搅拌鸡血细胞液DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。

(2)沉淀DNA时必须用冷酒精实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精,并在冰箱(至少5S以下)中至少存放24 h。

(3)正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动510 min。

三 参考资料

实验原理的补充介绍

1.DNA的释放 DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。同时,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),于是释放出DNA,当然也有RNA。但是,释放出来的大量DNA和RNA往往与蛋白质结合在一起。

2.将DNA与蛋白质分离 根据二者的特性,即在浓度较高的氯化钠溶液(物质的量浓度为2 moL/L )中,核蛋白容易解聚,游离出DNA。而DNA在浓度较高的氯化钠溶液中的溶解度很高,Na+与带负电的DNA结合成DNA钠盐。这时DNA在溶液中呈溶解状态。

3.DNA的析出与获取 利用DNA在浓度较低的氯化钠溶液中溶解度小的原理,向含有DNA的浓度较高的氯化钠溶液中加入大量(300 mL )蒸馏水,稀释氯化钠溶液,使DNA的溶解度下降,而蛋白质的溶解度增高(这就是蛋白质的盐溶现象),从而使二者分离。这时,加上不停地搅拌,溶解度下降的DNA逐渐呈丝状物。再通过过滤,滤去蛋白质,就可以获取DNA的黏稠物了。如果采用离心法则更好,用4 000 r/min 的旋转频率,离心15 min ,除去上清液(含有蛋白质),留下的沉淀物中含DNA。

4.DNA的再溶解 再用较高浓度的氯化钠溶液去溶解DNA黏稠物。

5.DNA的沉淀和浓缩 除去了蛋白质的核酸溶液,必须再进一步沉淀和浓缩。最常用的方法是酒精沉淀法。就是将含有Na+的DNA溶液,加入到相当于其两倍体积的体积分数为95%冷酒精溶液中,混匀以后可以使DNA沉淀、浓缩,形成含杂质较少的DNA丝状物,悬浮于溶液中。如果出现的丝状物较少,可以将此混合液再放入冰箱中冷却几分。浓缩后的DNA丝状物,可以用缓缓旋转玻璃棒的方法卷起(因为玻璃棒有吸附DNA的作用)。

6.DNA的鉴定 本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法(配方见下述的“药品配制”)。二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色)。

鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关。

二苯胺试剂的配制

A液: 15 g二苯胺溶于100 mL 冰醋酸中,再加15 mL浓硫酸,用棕色瓶保存。如冰醋酸呈结晶状态,则需加温后待其熔化,再使用。

B液: 乙醛的体积分数为0.2%的溶液。

配制: 将0.1 mL B液加入到10 mL A液中,现配现用。

DNA粗提取与鉴定的另一种方法

1.材料用具

新鲜菜花(或蒜黄、菠菜)。

塑料烧杯,量筒,玻璃棒,尼龙纱布,陶瓷研钵,试管,试管架,试管夹,漏斗,酒精灯,石棉网,三角架,火柴,刀片,天平。

研磨液,体积分数为95%的酒精溶液,二苯胺试剂,蒸馏水。

2.方法步骤

(1)DNA的粗提取

①准备材料 将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24 h。

②取材 称取30 g菜花,去梗取花,切碎。

③研磨 将碎菜花放入研钵中,倒入10 mL研磨液,充分研磨10 min 。

④过滤 在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1 000r/min的旋转频率,离心25 min,取上清液放入烧杯中)。在4 ℃冰箱中放置几分后,再取上清液。

⑤加冷酒精 将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的冷酒精溶液中,并用玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀35 min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。

(2)DNA的鉴定

①配制二苯胺试剂 取0.1 mL B液,滴入到10 mL A液中,混匀。

②鉴定 取4 mL DNA提取液放入试管中,加入4 mL 二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100 ℃)加热10 min 。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。

研磨液的配制方法

Tris:10.1 g(相对分子质量为121.14),先加50 mL 蒸馏水溶解,用物质的量浓度为2 moL/L 的盐酸调至pH8.0,再加下述药品。

NaCl:8.76 g(相对分子质量58.44)

EDTA:37.2 g(相对分子质量372.24)

SDS:20 g(相对分子质量288.3)

待上述药品全部溶解后,再用蒸馏水定容至1 000 mL。

若在室温低于20 ℃时配制药液,SDS呈沉淀析出,此时需要加温,才能将SDS溶解。如果提前配制的研磨液出现了沉淀,则应加温使沉淀溶解后再使用。

研磨液中几种药品的作用

SDS(十二烷基磺酸钠):可使蛋白质变性,与DNA分离。

EDTA(乙二胺四乙酸二钠):为DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNA。

物质的量浓度为0.15 moL/L的氯化钠溶液:能很好地溶解DNA。

Tris/HCl:提供缓冲体系,DNA在这个缓冲体系中呈稳定状态。(Tris为三羟甲基氨基甲烷)

鉴定DNA的其他方法 用紫外灯照射法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。

1.配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭(EB)溶液。

2.将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴1滴EB溶液染色。

3.将蜡纸放在紫外灯(260 nm)下照射(暗室中),可见橙红色的萤光(DNA的紫外吸收高峰在280 nm处)。

研磨液的配方

研磨液分好多种, 基本上有四种: 1. 水性: 呈绿.蓝透明,可增加切削并帮助散热. 2. 油性: 大多为白色不透明, 动物性油, 可增加光洁度. 3.混合型(乳化型): 水性油性混合, 依实需状况调整比例. 4. 专用型: 量身订作的专用配方. 总论: 各型研磨液的配方在不同的制造厂家又有不同的配方. 这个题目很大, 找一家研磨液厂家目录, 对你最有实际帮助.

弗氏完全佐剂的配方是什么,卡介苗的最低浓度时多少?

制备IgG-弗氏完全佐剂

(1)配制佐剂:称取羊脂10g,取石腊油40ml(一般为1∶4,夏天可减少石腊油比例)置高压灭菌器灭菌后用无菌研钵研磨均匀,置4℃冰箱过夜,次日仍均匀粘稠无分层,即成为福氏不完全佐剂。将其放入无菌研钵、按一个方向边研磨边加入卡介苗(以10ml不完全佐剂计,应加卡介苗30~100mg),磨毕置4℃冰箱过夜,如不分层即可使用,此为弗氏完全佐剂(现有市购商品)。

研磨液的 配方

油剂研磨液由航空汽油、煤油、变压器油及各种植物油、动物油及烃类,配以若干添加剂组成。  水剂研磨液由水及各种皂剂配制而成。具体的比例不知道。

什么叫研磨剂?怎样配制液体研磨剂?

答:所谓研磨剂,是磨料与润滑剂合成的一种混合剂。 常用的研磨剂有液体和固体(或膏状)两大类,它们是根据 实践经验研制而成的。所以直接选用按规定配制的研磨剂进 行研磨,将会收到使用方便、工艺相对稳定的良好效果。 液体研磨剂由研磨粉、硬脂酸和航空汽油等配制而成。 以下介绍两种常的配方, 第一种· 白刚玉粉W3.5--W l 20克, 硬脂酸 0.5克; 航空汽汕 200毫升。 按上述配制的研磨剂,浸泡一周后即可使用。使用这种 研磨剂嵌砂时,需先在研具表面上涂划少量的硬脂酸,之后 再将研磨剂晃均例在研具表面上并涂均,待汽油挥发后,再 滴上数滴煤油调匀,然后即可嵌砂。 第二种 白刚玉粉W3~W1 15克; 硬脂酸 8克; 航空汽油 200毫升; 煤油35毫升。 按这种配方配制的研磨剂,在使用时,可直接倒在研具 表面上涂均,待汽油挥发后嵌砂(困这种研磨剂预先已加入 丁适量的硬脂酸和煤油)。 其中,磨料主要起切削作用。硬脂酸溶于汽油中,可增 加汽油的粘度,以降低磨粒的沉淀速度,使磨粒更易均布。 此外,在嵌砂或研磨时,硬脂酸还有冷却润滑和促进氧化的 作用。航空汽油主要起稀释作用,将磨粒聚团稀释开,以保 证磨粒的切削性能。在这里煤油主要起冷却润滑作用。 ,是磨料与润滑剂合成的一种混合剂。 常用的研磨剂有液体和固体(或膏状)两大类,它们是根据 实践经验研制而成的。所以直接选用按规定配制的研磨剂进 行研磨,将会收到使用方便、工艺相对稳定的良好效果。 液体研磨剂由研磨粉、硬脂酸和航空汽油等配制而成。 以下介绍两种常的配方, 第一种· 白刚玉粉W3.5--W l 20克, 硬脂酸 0.5克; 航空汽汕 200毫升。 按上述配制的研磨剂,浸泡一周后即可使用。使用这种 研磨剂嵌砂时,需先在研具表面上涂划少量的硬脂酸,之后 再将研磨剂晃均例在研具表面上并涂均,待汽油挥发后,再 滴上数滴煤油调匀,然后即可嵌砂。 第二种 白刚玉粉W3~W1 15克; 硬脂酸 8克; 航空汽油 200毫升; 煤油35毫升。 按这种配方配制的研磨剂,在使用时,可直接倒在研具 表面上涂均,待汽油挥发后嵌砂(困这种研磨剂预先已加入 丁适量的硬脂酸和煤油)。 其中,磨料主要起切削作用。硬脂酸溶于汽油中,可增 加汽油的粘度,以降低磨粒的沉淀速度,使磨粒更易均布。 此外,在嵌砂或研磨时,硬脂酸还有冷却润滑和促进氧化的 作用。航空汽油主要起稀释作用,将磨粒聚团稀释开,以保 证磨粒的切削性能。在这里煤油主要起冷却润滑作用。

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